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薄層層析(TLC)技術(shù)在生物堿中的應(yīng)用介紹

薄層層析法(Thin Layer Chromatography)是一種微量分離方法,分離效果好,樣品用量少,靈敏度高,分析速度快,它不僅可以用于純物質(zhì)的鑒定,也可用于混合物的分離、提純及含量的測(cè)定。還可以通過(guò)薄層層析來(lái)摸索和確定柱層析時(shí)的洗脫條件。 
目前該技術(shù)廣泛應(yīng)用于以下方面:1.藥品和制劑的質(zhì)量控制和雜質(zhì)檢查;2.化學(xué)反應(yīng)進(jìn)程的控制,反應(yīng)副產(chǎn)物的檢查和中間體的分析;3.柱層析分離條件的探索;4.精制和制備;5.臨床和生化檢驗(yàn);6.毒物分析;7.中藥材品種的真?zhèn)螜z查和代用品的尋找;8.中草藥的成分分析和含量測(cè)定等。 
根據(jù)分離的原理不同,薄層層析可以分為兩類:用吸附劑鋪成的薄層所進(jìn)行的層析為吸附薄層層析;用纖維素粉、硅膠、硅藻土為支持劑鋪成的薄層,屬于分配薄層層析。吸附薄層主要是利用吸附劑對(duì)樣品中各成分吸附能力不同,及展開(kāi)劑對(duì)它們的解吸附能常不能得到準(zhǔn)確的結(jié)果,因?yàn)樗褐心承┏煞郑ㄈ绲鞍踪|(zhì)、鞣質(zhì)、力的不同,使各成分達(dá)到分離。吸附作用主要由于物體表面作用力、氫鍵、絡(luò)合、靜電引力、范德華力等產(chǎn)生。吸附強(qiáng)度決定于吸附劑的吸附能力,還受被吸附成分的性質(zhì)影響,更與展開(kāi)劑的性質(zhì)有關(guān)。分配層析的一般原理:在展開(kāi)過(guò)程中,各成分在固定相和流動(dòng)相之間作連續(xù)不斷的分配,由于各成分在兩相間的分配系數(shù)不同,因而可以達(dá)到相互分離的目的。 
薄層層析法是將吸附劑在玻璃、金屬或塑料等光潔表面上均勻的鋪成薄層,之后點(diǎn)樣,以流動(dòng)相展開(kāi)。薄層色譜法屬于吸附色譜法的范疇,組分不斷的被吸附劑吸附,又被流動(dòng)相解析而向前移動(dòng)。由于吸附劑對(duì)不同組分有不同的吸附能力,因此在流動(dòng)相向前移動(dòng)的過(guò)程中,不同組分移動(dòng)不同距離,使各組分根據(jù)吸附能力或分配系數(shù)的不同得到分離。 
張?zhí)m蘭[25]等利用薄層層析法對(duì)分離純化得到的鉤吻生物堿進(jìn)行定性的鑒別。展開(kāi)溶劑系統(tǒng)為氯仿:甲醇=94:6,對(duì)鉤吻總生物堿進(jìn)行鑒別,得到較好的效果。 
張為民等利用薄層層析法對(duì)從苦豆子中提取的生物堿進(jìn)行單體分離,展開(kāi)溶劑系統(tǒng)為乙酸乙酯:乙醇:濃氨水=5:1:0.5,成功的對(duì)生物堿進(jìn)行了單體的分離,并確定其中一個(gè)為苦參堿。姜典鎮(zhèn)等利用薄層層析法測(cè)定食品中阿片生物堿含量進(jìn)行了研究,展開(kāi)溶劑系統(tǒng)為乙酸乙酯:甲醇:氨水=85:5:2,準(zhǔn)確的檢測(cè)了食品中阿片生物堿的含量。
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